科研进展 | 冯雁教授团队在微液滴酶超高通量筛选领域获突破性进展
发布时间:2016-08-26
内容来源: 微生物代谢全国重点实验室
近日,分析化学领域的著名杂志Analytical Chemistry在线刊登了上海交通大学生命科学技术学院冯雁教授团队在酶超高通量筛选体系构建方面的突破性进展“Substrate Engineering Enabling Fluorescence Droplet Entrapment for IVC-FACS Based Ultrahigh-Throughput Screening”(DOI: 10.1021/acs.analchem.6b01712),马富强博士为第一作者,杨广宇副研究员为通讯作者,加拿大不列颠哥伦比亚大学Stephen G. Withers教授和Michael Fischer博士为共同作者。
定向进化是探索酶催化机制和对酶功能进行重塑的重要技术途径,目前影响其成功关键瓶颈之一是缺少有效的高通量筛选方法。研究团队在以往的工作中建立了基于微液滴反应器的酶超高通量筛选体系,其筛选速度可高达108个克隆/天,比常规的孔板法筛选快1000倍以上,同时极大地降低了昂贵的荧光底物的消耗(PloS One. 2014, 9(2): e89785)。然而由于许多商品化荧光底物在微液滴反应器无法很好的保留,造成荧光信号在微反应之间发生扩散,导致筛选准确度降低、效率下降,使得该体系的应用范围受到了限制。